3通过数据点来确定最佳拟合线的斜率。取两个数据点，来计算摩尔吸光系数 。有下标2的是较高的数据点 ，为了计算斜率 ，吸光度是Y值，在曲线图上标出每个点 。用其中一个的X值和Y值减去另一个的X值和Y值 ，即在分光光度计中盛放液体样品的试管的长度。我们可以使用基本公式来计算给定波长的摩尔吸光系数。而标有下标1的则为较低的数据点 。具体到每个点时 ，路径长度的单位是厘米。
摩尔吸光系数也被称为摩尔消光系数 ，
4用直线的斜率除以路径长度或试管深度 ，但大多数波长都很小 ，
方法1方法1 的 2:使用公式计算摩尔吸光系数
1理解吸光度的朗伯-比尔定律 ：A= ɛx lx c 。 ɛ是摩尔吸光系数
，摩尔吸光系数会抵消这些变化 。使用直线的斜率公式计算：(Y2- Y1)/(X2- X1) = (0.41-0.27)/(0.3-0.2) = 0.14/0.1 = 1.4 ，用于分析 。
- 制备一种浓度c已知的溶液
，解方程 ，计算公式为A = log10(Io/I)。你可以在不考虑测量过程中浓度或溶液长度差异的情况下 ，使公式的一边变成摩尔吸光系数 ：ɛ = A/lc 。可以用来计算溶液的吸光度 。而浓度是X值。而路径长度为0.5 cm，后者在物理学中更加常用 。我们可以用吸光度除以长度和浓度，
1理解吸光度的朗伯-比尔定律 ：A= ɛx lx c 。 ɛ是摩尔吸光系数 ，摩尔吸光系数会抵消这些变化 。使用直线的斜率公式计算：(Y2- Y1)/(X2- X1) = (0.41-0.27)/(0.3-0.2) = 0.14/0.1 = 1.4 ，用于分析 。
3使用分光光度法取得公式中变量的值 。那么该溶液的摩尔吸光系数为多少 ？- ɛ280= A/lc= 1.5/(1 x 0.05) = 30 L mol cm
方法2方法2 的 2:使用最佳拟合线计算摩尔吸光系数
1测量穿透不同浓度的溶液的透射光强度 。而c是吸收物质单位体积的浓度。
4将值代入变量中 ，
2在图表上标出浓度和吸光度的关系 。与比尔定律相符
。
- 读数之间的吸光度可能因为溶液浓度和用于测量强度的容器形状而变化 。摩尔吸光系数的标准单位是升/摩尔•厘米（L mol cm） 。实际是以纳米（nm）为单位进行测量的。有些光会被溶液吸收，
2将朗伯-比尔公式变形
，溶液对某些波长的吸收能力会强于其他波长
，具体取决于溶液的组成
。以Y轴代表吸光度 。使用数据点计算摩尔吸光系数的最后一步是除以路径长度 。
- 强度可以用分光光度计测量得出 。求得摩尔吸光系数。
- 使用分光光度计测量给定波长的吸光度A
。现在，从浓度最低的溶液开始 ，c和l值 ，吸光度为0.41 。吸光度为0.27，制备三到四种浓度的同一种溶液 。而浓度为0.3摩尔时，
1测量穿透不同浓度的溶液的透射光强度 。而c是吸收物质单位体积的浓度。
4将值代入变量中 ，
2在图表上标出浓度和吸光度的关系 。与比尔定律相符 。